HL-60(人原髓细胞白血病细胞)

一、细胞基本属性
细胞名称 人原髓细胞白血病细胞
细胞别称 HL-60; HL 60; HL60
细胞货号 SNL-040
细胞种属
生长情况 悬浮
培养条件 1640+10%FBS+1%双抗
培养环境 air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、细胞培养操作
换液周期 2-3天
培养基体积 T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
传代比例 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)
传代方法 1.混匀细胞,收集细胞培养基,900rpm离心3-5min,弃上清;
2.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;
3.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;
注意事项 部分悬浮细胞会附着瓶底,轻轻晃动培养基或者吹打细胞面就会脱落,不需要胰酶消化。建议使用培养皿培养,更适合吹打细胞操作,吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。
三、细胞冻存操作
冻存液配方 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格 200-300万/ml,1ml每管
冻存方法 1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;
3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存
注意事项 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案

Tips:
1.细胞悬浮圆形生长,偶有小聚团,部分细胞附着瓶底;
2.圆形透亮、细胞膜完整的细胞是活细胞,如果无法判断,可以取少量细胞用台盼蓝染色后计数确定细胞活率;
3.悬浮细胞密度维持1E5-5E5/ml之间,密度过低或者过高可能会影响细胞状态;

我们推荐使用尚恩生物HL-60(人原髓细胞白血病细胞)专用完全培养基(产品货号:SNLM-040)作为体外培养HL-60(人原髓细胞白血病细胞)的培养基。

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