HFL1(人胚肺成纤维细胞)

一、细胞基本属性
细胞名称 人胚肺成纤维细胞
细胞别称 HFL1; HFL-1; HFL 1; Human fetal lung fibroblast 1; HFL
细胞货号 SNL-017
细胞种属
生长情况 贴壁
培养条件 H-DMEM+10%FBS+1%双抗
培养环境 air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、细胞培养操作
换液周期 2-3天
培养基体积 T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
传代比例 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)
传代方法 1.尽量吸干净T25瓶原培养基;
2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;
4.将培养瓶放入37度培养箱消化;
5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;
6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;
7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;
8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;
注意事项 不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间
消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。
三、细胞冻存操作
冻存液配方 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格 200-300万/ml,1ml每管
冻存方法 1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;
3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存
注意事项 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案

Tips:
1.细胞培养时黑点可能会比较多,具体原因参见培养操作说明2、3条;
2.细胞贴壁偏弱,消化时间过长可能会导致传代后细胞不长,注意严格控制消化时间;
3.细胞传代数有限,建议收货后5-6代内完成实验;

我们推荐使用尚恩生物HFL1(人胚肺成纤维细胞)专用完全培养基(产品货号:SNLM-017)作为体外培养HFL1(人胚肺成纤维细胞)的培养基。

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