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2型糖尿病患者调节性T细胞与羟维生素的资料与方法
2018年08月07日 10:27   化工热点  

1.1 一般资料
该院就诊的 T2DM患者 42 例。其中,男性 26 例,女性 16 例;病程 1 ~ 40年,平均 10.5 年 ;年龄 35 ~ 86 岁,平(60.36±12.22)岁。所有患者均符合 1999 年世界卫生组织的 DM 诊断标准。排除标准 :①非 DM 因素导致的神经病变(如腰椎病变、VB12 缺乏及格林 - 巴利综合征等)、甲状腺功能亢进症及恶性肿瘤等 ;②合并有DM 高渗昏迷、低血糖及 DM 酮症酸中毒等急性并发症 ;③合并有各类急性或慢性感染 ;④有骨质疏松和其他骨代谢异常疾病病史 ;⑤肝肾功能障碍、心功能不全及甲状旁腺疾病;⑥半年内使用过甲状旁腺激素、降钙素、类固醇激素、VD 制剂及性激素等药物。
1.2 方法
1.2.1一般资料采集 记录每位患者性别、年龄、DM 病程等一般数据,测量身高、体重,计算体重指数(body mass index, BMI)。
1.2.2实验室检查 所有受试者空腹≥ 8 h,于次日清晨抽取静脉血,采用 AU2700 型全自动生化分析仪(美国贝克曼库尔特公司)测定 TG、TC、HDL-C、LDL-C、
Scr、BUM 及尿微量白蛋白(urine microalbuminuria,UMA);采用糖化血红蛋白测定仪(美国 Bia-rad 公司)对 HbA1c 水平进行测定。
1.2.3VD 3 水平测定及分类 抽取所有受试对象空腹静脉血,采用 25-(OH)D 3 试剂盒(英国 IDS 公司)用酶联免疫吸附测定法测定。依据25- (OH)D 3 的水平:≤ 50 nmol/L 为 VD 3 缺乏;50 ~ 75 nmol/L 为 VD 3 不足;≥ 75 nmol/L 为 VD 3 充足[7] 。
1.2.4CD4+ Tregs 检测 使用 PF-anti-CD25/FITC-anti-CD4 荧光标记抗体(美国 Serotec 公司)标记两组分离好的单个核细胞样本,采用流式细胞仪(美国BD 公司)进行 Tregs 检测,采用 CXP Cytometer(美国贝克曼库尔特公司)对数据进行收集和分析。
1.2.5DPN 诊断 对受试者使用肌电诱发仪(日本光电工业株式会社)进行肌电图检查。确诊 DPN 标准[8]:在明确诊断 DM 同时或之后出现神经病变,临床表现与 DPN 表现(麻木、疼痛及感觉异常等)相符;5 项检查(温度觉、足部感觉、踝反射、振动觉及神经传导速度)≥ 2 项为异常。
1.3 统计学方法
数据分析采用 SPSS 16.0 统计软件,计量资料以均数 ± 标准差(x±s)或中位数(四分位数)表示,比较用 t 检验,不满足或用轶和检验,相关分析采用
Pearson法或Spearman法, P <0.05为差异有统计学意义。